정의 : 1 흡광도 단위는 260nm 파장에서 1cm 석영 큐벳에서 1ml 부피를 측정 할 때 1의 판독 값을 산출하는 핵산의 양으로 정의됩니다. 사실 이것은 Beer-Lambda 방정식.
A = ebc
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A는 흡광도 (A = log10 P0 / P이므로 단위 없음)
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e는 L mol-1 cm-1의 단위를 갖는 몰 흡광도이다
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b는 샘플의 경로 길이 - 즉 샘플이 들어있는 큐벳의 경로 길이입니다. 이 측정 값을 센티미터 단위로 표현할 것입니다..
바이오 웨이브 II
네 개의 DNA 염기에 대한 개별 흡광 계수는 다음과 같습니다.
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A = 259nm에서 최대 흡광도, 흡광 계수 = 15.4x103 M-1 x cm-1 (pH 7.0).
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C = 271nm에서 최대 흡광도, 흡광 계수 = 9.0x103 M-1 x cm-1 (pH 7.0).
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G = 253nm에서 최대 흡광도, 흡광 계수 = 13.7x103 M-1 x cm-1 (pH 7.0).
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T = 267nm에서의 흡광도 최대, 흡광 계수 = 9.6x103M-1 x cm-1 (pH 7.0).
이 값들로부터 우리는 4 개의 뉴클레오타이드의 평균 소광 계수 인 값 10을 도출하는 것을 관찰 할 수있다.
실용적인 공식 : 몰 농도를 얻기위한 매우 간단하고 유용한 공식은 다음과 같습니다 :
올리고의 나노 몰 수 = 1 / Ix10
어디에
I = 올리고 길이
10 = 모든 4 개 뉴클레오타이드의 평균 소광 계수
예 : 20mer oligo의 1 OD에 몇 마이크로 몰이 존재 하는가??
? 몰 = 1 / 20x10 = 0.005 = 5 나노 몰
유용한 DNA 데이터 근사치 :
* 1 긴 SSDNA의 A260 = 37μs
* 1 oligos DNA의 A260 = 33㎍s
* 1 oligos ssRNA의 A260 = 33';gs
* 1 dsDNA의 A260 = 50㎍s
* 1 dsRNA의 A260 = 40㎍s
참고 : 이중 형성시 담금질 효과, 흡광도는 개별 가닥의 정확한 첨가가 아니라 약 1.5 배 (예상 한 두 배가 아닌)입니다..
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